自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用 [复制链接]

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三、《本身抗体探测在本身免疫性疾病中的临床运用大师提议》十三条

本《提议》可为宽广临床大夫和搜检医生在常日医疗实验中拟订探测项目及探测过程时供应参考。本身抗体探测的正当运用有赖于搜检大夫和临床大夫的连连合营。

1、《提议》十三条

2《提议》解读

（1）对临床嫌疑有本身免疫性疾病的患者提议举办本身抗体的探测。疾病分类或诊断准则中列出的本身抗体应在探测之列。需求连合患者病史、病症、体征及本身抗体程度等对本身免疫性疾病举办诊断及识别诊断。

由于本身抗体在本身免疫性疾病的诊断及病情评料中有首要意义，是以提议在临床嫌疑有本身免疫性疾病的患者中举办探测，而且在患者医治过程中，也提议取舍性复查本身抗体，用于评估疗效及指点下一步医治。

非本身免疫性疾病患者或小量衰弱人群在没有本身免疫性疾病临床特性时也也许呈现低滴度的本身抗体。是以，这些本身抗体的阳性结束不肯定与本身免疫性疾病干系。实验室探测应以临床展现为根据，对没有稀奇性本身免疫性疾病临床展现的个人不提议举办本身抗体的筛查。生理性本身抗体和本身抗体在疾病前期呈现的景象常搅扰临床大夫对本身抗体临床意义的无误解读。

部份疾病在分类或诊断准则中囊括的本身抗体对诊断有首要意义，如SLE诊断准则中囊括的ANA、抗双链DNA抗体，SS诊断准则中的ANA、抗SSA、抗SSB抗体，MCTD诊断准则中的抗U1RNP抗体，APS诊断准则中的CL、B2-GP1、LA等。是以，在举办诊断及识别诊断时，应对响应的这些本身抗体举办探测。由于不同的本身抗体在不同疾病中的敏锐性及稀奇性有所不同，临床大夫应在充足熟悉各类本身抗体临床参考意义的前提下，凭借疑诊疾病范例举办取舍，并将结束与患者临床特性、其余搜检结束相连合，做出正当诠释。

（2）本身抗体的探测提议采用国际保举（或公认）的探测法子。

本身抗体探测法子的取舍取决于实验室的详细前提、试剂的价钱、出汇报时光以及职掌者的阅历等。本身抗体罕用的探测法子囊括直接免疫荧光法、免疫痕迹法、酶联免疫吸附法、免疫散射比浊法、化学发光免疫测定法、免疫胶体金法、乳胶凝固法、喷射免疫法、免疫雀斑法等。暂时，国内采取的定性探测法子较多，而海外更多采取定量探测法子。

探测法子的敏锐度和稀奇性彼此依存的相干，决议了探测的效用和探测结束的靠得住性。当敏锐度增大时，稀奇性响应低沉，反之亦然。在现实处事中，该当凭借设定的临界值（cut-off）和探测法子自己固有的性格，正当取舍符合的探测法子。假如做为一种筛查实验，敏锐度高的探测法子应做为首选，并对假阳性的处境加以识别；在确认实验中，该当采选稀奇性高的探测法子。当统一种抗体用不同法子探测的结束不同时，应经过更稀奇的探测法子举办断定。

（3）本身抗体的探测结束提议以定量或半定量方法抒发。

本身抗体探测结束应尽大概以定量方法抒发，如没法举办定量探测，提议采用半定量方法，对临床有更好的参考意义。常常定量探测结束越高，临床意义越大，诊断的稀奇性程度越高。部份本身抗体高出寻常值上限三倍以上可视为高滴度阳性。定量或半定量显示结束再有益于疾病先后或医治先后举办对照，对疾病的监测或疗效的评估有首要价钱。

（4）当本身抗体搜检结束与临床处境不符时，提议连合患者性别、年纪、病史及其余实验室目标等特性，对搜检结束做出恰当诠释及下一步提议。

对临床高度疑似本身免疫性疾病的患者，假如某一种法子探测本身抗体结束为阴性或弱阳性，或当阳性的探测结束与临床特性不符时，提议操纵另一种探测法子对结束加以确认。

若偶尔发掘某种抗体存在，而无临床展现，应评估该抗体对该个人预后的影响，并连合患者年纪、性别、临床其余干系疾病及其余实验室目标归纳评估。由于本身抗体可呈此刻临床展现以前，是以须要时可举办按期复诊及实验室目标监测。弗成忽略不少本身抗体可早于临床展现前多年呈现，并具备肯定的猜测价钱，如抗CCP抗体、AMA-M2等。

临床医生和搜检科医生应在须要时针对患者的临床及实验室结束特性举办疏通，连结商酌决议下一步探测项目或赋予患者何种提议。

（5）诊断系统性本身免疫性疾病时，ANA应做为初筛项目之一。当IIF-ANA阳性时，需求对ANA稀奇性本身抗体进前进一步探测。

ANA对本身免疫性风湿性疾病有很高的诊断敏锐性，因此被觉得是此类疾病的首选筛查项目。如ANA是SLE、SSc、SS等患者的实验室连结特性之一，同时也是MCTD诊断的必须前提之一。是以，在疑诊或需求除外此类疾病时，提议举办ANA的探测。但由于ANA滴度值与病情严峻性没有肯定关联，是以，不保举操纵ANA滴度值的改变来响应风湿性疾病的行动性和疗效响应性。

ANA探测遮盖的本身抗体局限万分遍及，罕见的本身抗体囊括但不限于，抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗Ro（SS-A）抗体、抗La（SS-B）抗体、抗U1-RNP抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体、抗核糖体P卵白抗体、抗CENP抗体、抗核小体抗体、抗着丝点抗体等。当ANA结束阳性时，需求对ANA稀奇性本身抗体进前进一步探测，为确诊是何种本身免疫性疾病供应根据。

系统性本身免疫性疾病患者，以IIF法探测ANA结束如为阴性，大概道理有：第一，ANA干系抗体的缺失；第二，存在的是针对高度可溶性抗原的本身抗体，如抗Ro（SSA）抗体；第三，抗体针对的是含量一些的胞浆靶抗原，如Jo-1、Ro（SSA）等。是以，当患者临床展现高度嫌疑罹患某种风湿性疾病（特为是干枯归纳征和皮肌炎/高发性肌炎）的患者，纵然IIF-ANA阴性，也该当思考举办ANA稀奇性本身抗体的探测。由于探测法子敏锐性差别及靶抗原特性，IIF探测ANA阴性而稀奇性抗体阳性景象的产生率在临床上约为5%-10%。

（6）ANA探测提议以HEp-2细胞为底物的IIF法为首选。IIF-ANA探测汇报中提议阐扬探测法子、稀奇性荧光核型和抗体滴度值，同时指出寻常参考区间和临界值。

ANA探测法子中，直接免疫荧光法职掌容易，敏锐度高，花费便宜，是暂时国际上遍及保举操纵的法子。

IIF-ANA在HEp-2细胞上的榜样荧光形式有下列几类，每类中又囊括也许辨识的几种荧光形式。1.细胞核型：核均质、核颗粒、核仁、着丝粒、核点、核膜、弥漫细颗粒、增殖性细胞核抗原等；2.胞浆型：胞浆颗粒、线粒体、核糖体、高尔基体、溶酶体、细胞骨架等；3.有丝破裂型：纺锤体、重心体、细胞核基质卵白、中央体等。ANA核型结束对下一步稀奇性抗体的探测有肯定的指点意义。

ANA探测结束保举以滴度值示意，即阳性血清正好呈阳性响应的最大稀释倍数的倒数。暂时紧要有两种稀释编制，一种是1:40、10、1:、1:……；另一种是1:、1:、1:0、1:0……。当ANA为弱阳性结束，看来于正凡人群（囊括妊妇、暮年人等）或感化性疾病、肝脏疾病、肿瘤性疾病等多种非本身免疫性疾病患者。当ANA结束为阴性或弱阳性时，应凭借临床处境做出决断是不是需求进一步对稀奇性抗体举办探测或亲切监测。ANA滴度越高，与本身免疫性疾病的干系性越大。搜检汇报单上除搜检结束外，还应阐扬参考值、探测法子。

每个临床实验室都需求经过临床实验来断定实用于本实验室的ANA寻常参考值局限和临界值。ANA滴度值自己是一种不严峻的定量，与疾病行动度的干系性很低，是以没有须要对ANA做接连的跟踪探测。

（7）抗dsDNA抗体探测提议以短膜虫IIF或喷射性免疫法（Farrassay）或ELISA法子探测。连合临床需求，可举办两种法子平行探测。

抗dsDNA抗体探测的罕用法子是IIF法或喷射性免疫法或ELISA法子。个中喷射性免疫法（Farr法）探测高亲和力抗dsDNA抗体，在诊断SLE方面稀奇性高，但出于处境掩护方面的思考，这类法子的操纵遭到很大束缚。IIF法容易有用，是暂时遍及操纵的用于探测高亲和力和中等亲和力dsDNA抗体的法子，然则不能供应抗体的确的定量讯息。ELISA的探测敏锐度高于Farr法和IIF，也也许定量探测抗体，但有大概探测到没有临床意义的低亲和力抗体。有前提时，实验室也许用两种法子对立dsDNA抗体举办探测，以彼此印证。

（8）抗dsDNA抗体做为SLE疾病行动性的监测目标之一，应按期举办探测。

由于抗dsDNA抗体程度与SLE疾病行动度，特为是狼疮性肾炎亲切干系，且抗体程度的抬高也许呈此刻疾病复发以前，是以定量监测抗dsDNA抗体有助于SLE患者的临床病情评估。关于处于疾病行动期的患者，以每隔6-12周探测一次抗dsDNA抗体为好，而关于病情较为褂讪的患者，每隔6-12个月探测一次便可[20]。Farr法和ELISA均也许对立体程度给出的确的定量结束，但两者比拟，ELISA更为经济。

（9）对疑诊为类风湿关节炎的患者，应举办囊括类风湿因子、抗CCP抗体在内的干系本身抗体的连结探测，以提升RA的初期诊断率。

对疑诊为RA的患者，提议连结探测干系本身抗体，如RF、抗CCP抗体、AKA、APF等，以补救容易抗体敏锐性不够的缺陷，为RA的初期诊断供应根据。由于RF阳性看来于其余多种本身免疫性疾病（如SS、SLE、SSc等）、多种非本身免疫性疾病（如感化及肿瘤等）以及小量正凡人群，是以，弗成天真将RF阳性做为确诊根据，而应连合患者关节炎的临床特性、影象学根据及连结抗体探测结束等举办诊断。

（10）诊断抗磷脂归纳征及评估血栓危险时，提议举办抗CL抗体、抗β2-GP1、LA等抗磷脂抗体的连结探测。

与APS干系的抗磷脂抗体有多种，囊括抗CL抗体、抗β2-GPI抗体、LA、抗凝血酶原抗体、磷脂酰丝氨酸抗体、抗磷脂酸抗体、抗磷脂酰乙醇胺抗体等。个中诊断准则中说起的抗CL抗体、抗β2-GP1抗体、LA任一种阳性均也许提醒APS的诊断。在这3种抗体中，LA是血栓病变的最强危险因子；抗CL抗体诊断抗磷脂归纳征的敏锐性较高，但稀奇性较低；抗β2-GP1抗体是致病性抗体，稀奇性较高。提议对疑诊患者连结探测这些本身抗体，不光也许防止漏诊，还也许更通盘的评估血栓性疾病和病态怀胎的病发危险。阳性结束需求在12周后复查确认。

（11）对临床疑诊为ANCA干系性血管炎的患者提议举办ANCA测定，并针对立PR3及抗MPO稀奇性抗体举办探测。做为疾病行动性的监测目标之一，提议对立PR3及MPO抗体按期举办定量探测。

ANCA阳性对ANCA干系性血管炎的诊断有首要意义。是以，关于疑诊患者提议举办ANCA探测。ANCA在中性粒细胞胞浆中有多种靶抗原，囊括卵白酶3（PR3）、髓过氧化物酶（MPO）、机关卵白酶G（CG）、乳铁卵白（LF）等。个中PR3（属胞浆型ANCA即cANCA）和MPO（属核周型ANCA即pANCA）与ANCA干系性血管炎干系。ANCA阳性除见于ANCA干系性血管炎外，还可呈此刻炎症性肠病、本身免疫性肝病、其余本身免疫性疾病（如SLE、RA等）、淋巴瘤以及药物性或感化性疾病等，但靶抗原并非PR3或MPO。

ANCA的探测法子以IIF法及ELISA法为主。IIF法敏锐性较高，是辨别cANCA和pANCA的根底。但IIF法测定的是总ANCA，不能辨别靶抗原。是以，当IIF法探测ANCA荧光核型为阳性（cANCA或pANCA阳性）或临床疑诊为ANCA干系血管炎时，应进一步用ELISA法对立PR3或抗MPO稀奇性抗体举办探测，以增进对ANCA干系性血管炎诊断的稀奇性。在临床实验中，连结IIF和ELISA是探测ANCA的最好法子。

由于抗PR3及MPO抗体滴度与病情行动性一致，是以，可用做决断疗效及评估复发的目标，按期举办监测有助于指点临床医治。

（12）器官稀奇性本身免疫性疾病如肝脏、重心神经系统、血液系统、甲状腺等疾病，举办本身抗体探测有助于与非本身免疫性疾病或非抗体介导的本身免疫性疾病等举办识别。

特定器官受累的本身免疫性疾病如本身免疫性肝病、甲状腺疾病、重心神经系统疾病、胰腺疾病等，在与非免疫干系性疾病举办识别时，干系本身抗体的探测有首要意义。如AMA-M2在原发性胆汁性肝强硬诊断中的高度稀奇性，有助于与药物性肝伤害、病*性肝炎等疾病举办识别；又如抗甲状腺球卵白抗体（TG）和抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPO）可为本身免疫性甲状腺炎的诊断供应有力证明。是以，本身抗体的探测有助于器官稀奇性本身免疫性疾病的诊断。

（13）新本身抗体在本身免疫性疾病诊断及疾病监测中的影响还需求临床考证和讨论，临床处事中大夫应凭借患者详细处境正当采用。

频年来，越来越多的新抗体被证明在本身免疫性疾病的诊断和监测中有潜在的临床意义，有的曾经被参与最新的疾病诊断准则，如抗CCP抗体在RA的诊断中有首要价钱，已被参与年最新分类准则。跟着科学的进展，会有更多的本身抗体被发掘，更多的本身抗体运用于临床。个中不乏部份抗体由于其更为优胜的敏锐性及稀奇性被渐渐认同、遍及运用，以至替代原有目标用于临床。临床大夫和搜检医生既是医学学识的实验者也是循证医学研讨的介入者，在医疗过程中，该当对每个患者举办客观、详细、通盘的剖析，取舍恰当的新本身抗体探测项目，为本身免疫性疾病的诊断和治理供应根据。

摘自：微诊网

原因：重心西院搜检科

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